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近年来随着分离纯化技术的提高,关于外泌小体的研究成果颇丰;这进一步吸引了越来越多领域的课题将外泌体纳入研究对象。研究的前提是方便、高效、标准化地分离纯化外泌小体。经过近20年的探索,已经建立了超速离心法、沉淀法、色谱法、亲和纯化法
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这是一种用一步温和的离心完成渗滤而很大程度保持蛋白活性的好方法。为了与下游应用兼容,常常需要用透析或渗滤方法对蛋白样品进行缓冲液置换。传统透析方法需要时间很长,多步透析容易造成样品丢失、损耗和失活,而且***还需要一步浓缩。新产品
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蛋白亲和纯化(无需换液和浓缩)*本操作受Amicon®Ultra-0.5mL超滤管~1mg蛋白的容量限制。体积较大而蛋白浓度较低的情况下也可以采用如上方法,但溶液体积和离心时间等需要略加优化。3次低速离心,总耗时~75分钟(含60
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对于慢***推荐Amicon®Ultra100kDa;对于腺***推荐Amicon®Ultra50kDa。具体的操作步骤可以参考***浓缩纯化试剂盒FTLV00003和FTAV00003的产品使用说明书。另提供AAV(腺相关***
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蛋白如果浓缩过快或者过度浓缩都有可能引起蛋白沉淀。建议蛋白浓缩后的**终浓度不超过20mg/ml。对于对浓缩速度敏感而容易沉淀的蛋白,建议的改进方法是:1)离心力降为推荐离心力的30%-50%2)改用截留分子量更大的超滤管(如原本